产品货号:
GS2299
中文名称:
一步法RT-qPCR试剂盒
英文名称:
One-Step RT-qPCR Kit
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒以RNA为模板,反转录和qPCR在同一体系中连续进行。本试剂盒采用高质量的反转录酶和Taq DNA聚合酶,以及本公司研发的反应体系,大大提高了反应的扩增性能和特异性。反应过程中无需添加试剂,无需开盖,避免了污染。一步法RT-qPCR技术可用于RNA分子的检测和结构分析、cDNA克隆、RNA水平上的特定的基因表达分析等多种领域的应用。
组分 | 50T | 100T |
2×One-Step RT-qPCR MasterMix | 500μL | 1mL |
RT enzyme Mix | 35μL | 70μL |
RNase-free ddH2O | 1mL | 2mL |
保存:-20℃
- RNA样品要避免RNase污染。用于cDNA合成的器具须用0.1% DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液37℃处理12h;然后在120℃高压灭菌30min去除残留的DEPC。
- 用于RNA实验的试剂,须使用干热灭菌(180℃,60min)或者上述DEPC处理的器具盛装,使用的无菌水须用0.1% DEPC处理后进行高温高压灭菌。建议RNA实验使用的器具、试剂和无菌水专用。
- 当同时进行多次反应时,应将各种试剂配制成混合液然后分装到各个管中,以减少实验操作或实验之间的误差(整个反应过程应在冰浴条件下进行)。
- 本试剂盒不能使用Oligo(dT)或Random Primer合成第一链cDNA。
- 为了保证反应成功,请使用高质量的RNA模板。
- 将各组分溶解并分别混匀后,轻微短暂离心,然后冰浴放置。
- 在冰浴的PCR管中加入如下RT-PCR反应混合物:
成分 用量 2×One-Step RT-qPCR MasterMix 10μL 正向引物(10μM) 0.4μL 反向引物(10μM) 0.4μL RT enzyme Mix 0.65μL RNA Template 0.1~100ng RNase-free ddH2O 至20μL - 在实时荧光定量PCR仪上按下列条件进行一步法反应程序:
步骤 温度 持续时间 循环数 反转录 50℃ 5min hold 预变性 95℃ 3min hold 变性 95℃ 10s 40 退火/延伸/采集荧光信号 60℃ 30s 熔解曲线 按照仪器要求设置
相关搜索:一步法RT-qPCR试剂盒,一管式RT-qPCR试剂盒,One-Step RT-qPCR Kit